Uống nước giàu hydro làm giảm cơn đau thần kinh do hóa trị liệu thông qua việc điều chỉnh hệ vi sinh vật đường ruột

Uống nước giàu hydro làm giảm cơn đau thần kinh do hóa trị liệu thông qua việc điều chỉnh hệ vi sinh vật đường ruột

Uống nước giàu hydro làm giảm cơn đau thần kinh do hóa trị liệu thông qua việc điều chỉnh hệ vi sinh vật đường ruột
Tác giả Lian N , Shen M , Zhang K , Pan J , Jiang Y , Yu Y , Yu Y
Sở Khoa gây mê, Bệnh viện Đa khoa Đại học Y Thiên Tân, Thiên Tân, 300052, Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa; 2 Viện Gây mê Thiên Tân, Thiên Tân, Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa
Đã nhận vào ngày 22 tháng 10 năm 2020
Được chấp nhận xuất bản ngày 18 tháng 2 năm 2021
Xuất bản ngày 10 tháng 3 năm 2021 Tập 2021:14 Trang 681—691

Tóm tắt

Giới thiệu
Đau thần kinh do hóa trị liệu gây ra (CINP) là một trong những biến chứng phổ biến nhất của các loại thuốc hóa trị liệu. Đau thần kinh do hoá trị liệu gây ra làm hạn chế liều lượng và thời gian sử dụng thuốc điều trị chống ung thư để tăng khả năng cứu sống, và cũng làm giảm chất lượng cuộc sống của bệnh nhân. Các nghiên cứu trước đây của chúng tôi đã báo cáo rằng hydro phân tử (H2) có thể được sử dụng để ngăn ngừa và điều trị các bệnh khác nhau. Nhưng cơ chế cơ bản vẫn chưa rõ. Mục tiêu của nghiên cứu hiện tại là khám phá tác động của nước giàu hydro lên vi sinh vật đường ruột trong CINP.
Phương pháp
Tất cả chuột C57BL/6J được chia thành 4 nhóm: Nhóm cho ăn uống nước bình thường và tiêm nước muối sinh lý (H2 O + Saline), nhóm cho ăn nước uống bình thường và tiêm oxaliplatin (H2 O + OXA) , nhóm được nuôi bằng nước giàu hydro và tiêm nước muối (HW + Saline), và nhóm được nuôi bằng nước giàu hydro và tiêm oxaliplatin (HW + OXA). Ngưỡng rút chân cơ học của chuột đã được thử nghiệm vào các ngày 0, 5, 10, 15 và 20 sau khi xử lý nước giàu hydro. Vào ngày thứ 20, phân chuột từ các nhóm khác nhau được thu thập để phân tích cấu trúc và đa dạng quần thể vi sinh vật. Nồng độ các cytokine gây viêm (TNF-α và IL-6), các yếu tố gây stress oxy hóa (OH – và ONOO – ), lipopolysacarit (LPS) và thụ thể giống Toll 4 (TLR4) đã được phát hiện trong hạch rễ lưng (DRG), L4 -6 đoạn tủy sống và huyết thanh bằng xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme. Biểu hiện của TLR4 trong DRG và tủy sống được xác định bởi Western blot.
Kết quả
Kết quả cho thấy nước giàu hydro có thể làm giảm chứng tăng cảm giác đau do oxaliplatin gây ra, làm giảm sự đa dạng của vi khuẩn và thay đổi cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột, đảo ngược sự mất cân bằng của các cytokine gây viêm và stress oxy hóa, đồng thời làm giảm biểu hiện của LPS và TLR4.
Kết luận
Nước giàu hydro có thể làm giảm CINP bằng cách ảnh hưởng đến sự đa dạng và cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột, sau đó là con đường LPS-TLR4, cung cấp hướng nghiên cứu tiếp theo.
Từ khóa: nước giàu hydro, hệ vi sinh vật đường ruột, con đường CINP, LPS-TLR4.

Giới thiệu

Hóa trị là phương pháp quan trọng để điều trị các khối u ác tính. [1] Tuy nhiên, các loại thuốc hóa trị liệu, chẳng hạn như oxaliplatin, thường gây ra một số phản ứng gây hại. Đau thần kinh do hóa trị liệu (CINP) là một trong những biến chứng phổ biến nhất do điều trị bằng thuốc hóa trị liệu như oxaliplatin. Đau thần kinh ở tứ chi do thuốc hóa trị liệu làm hạn chế liều lượng và thời gian điều trị chống ung thư để tăng khả năng cứu sống, do đó làm giảm chất lượng cuộc sống của bệnh nhân. [2] Các biểu hiện lâm sàng chính là đau tự phát liên tục, đau rát từng cơn, tăng cảm giác nặng nề và mẫn cảm toàn bộ hoặc một phần chi sau khi dùng thuốc hóa trị. [3] Do tỷ lệ mắc bệnh đau thần kinh cao tới 70% và không có phương pháp điều trị hiệu quả nên bệnh nhân bị đau nghiêm trọng thường giảm thậm chí ngừng dùng thuốc hóa trị. Điều này dẫn đến việc không thực hiện kịp thời các chu kỳ hóa trị mới, giảm liều hóa trị và phải gián đoạn điều trị, ảnh hưởng nghiêm trọng đến chất lượng cuộc sống và tình trạng bệnh lý của bệnh nhân có khối u ác tính. [4]
Một loạt các cộng đồng vi sinh vật nằm trong đường ruột được gọi chung là hệ vi sinh vật đường ruột. [5] Hệ vi sinh vật đường ruột mang lại nhiều lợi ích quan trọng cho vật chủ và đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì, cân bằng đường tiêu hóa.Vi khuẩn ruột tự nhiên hoà hợp với niêm mạc biểu mô và thực hiện một loạt các chức năng sinh lý, như điều chỉnh tính nguyên vẹn của rào cản đường ruột, duy trì chuyển hóa chất liệu và điều chỉnh phản ứng miễn dịch và viêm. [6] , [7] Sự phong phú và đa dạng của vi sinh vật đường ruột thường được sử dụng như các chỉ báo về sự khỏe mạnh của đường ruột do mối tương quan nghịch của chúng với các bệnh mãn tính và rối loạn chức năng trao đổi chất. [8],[ 9] Người ta đã chỉ ra rằng việc áp dụng thuốc hóa trị liệu chỉ gây ra chứng đau thần kinh ở mô hình chuột không có mầm bệnh cụ thể, không quan sát thấy cơn đau do hóa trị liệu ở chuột không có mầm bệnh. [5]
Hydro phân tử (H2 ), được phân bố rộng rãi trong tự nhiên, là nguyên tố nhỏ nhất, nhẹ nhất và nhiều nhất trong vũ trụ, [10] và có chức năng chống oxy hóa, chống viêm và chống apoptotic (Apoptosis loại bỏ các tế bào trong quá trình phát triển mà không cần thiết cũng như tiêu diệt các tế bào tiền ung thư và nhiễm virus. Apoptosis duy trì cân bằng tế bào trong cơ thể người và đặc biệt quan trọng với hệ miễn dịch).[11] Là một chất ức chế oxi hóa tiềm năng, việc hít khí hydro hoặc uống nước giàu hydro đã được sử dụng rộng rãi trong các ứng dụng y học mà không gây ra các tác dụng phụ. [12] , [13] Các nghiên cứu trước đây của chúng tôi đã báo cáo rằng hít khí hydro 2% và uống nước giàu hydro có tác dụng bảo vệ chống lại các bệnh khác nhau, bao gồm chấn thương tái tưới máu do thiếu máu cục bộ, nhiễm trùng huyết, hội chứng rối loạn chức năng đa cơ quan, tiểu đường loại II và các bệnh thoái hóa thần kinh ở động vật hoặc các mô hình tế bào [11] ,[14]–[17]. Một báo cáo năm 2016 mô tả một trường hợp thú vị, trong đó 70% các loài vi khuẩn đường ruột có khả năng di truyền để trao đổi chất H2, điều này cho thấy rằng H2 có thể ảnh hưởng đến hoạt động, quần thể hoặc cộng đồng vi khuẩn đường ruột. [18] Với các hiệu ứng bảo vệ của H2 đối với các bệnh mãn tính và rối loạn chuyển hóa, liệu pháp uống nước giàu hydro có thể ảnh hưởng đến sự phong phú và đa dạng của hệ vi sinh vật đường ruột.
Các thụ thể giống Toll (TLR) là một loại phân tử protein bề mặt quan trọng liên quan đến khả năng miễn dịch không cụ thể (miễn dịch tự nhiên). Chúng có thể nhận biết cụ thể nhiều tín hiệu nguy hiểm ngoại sinh và nội sinh khác nhau, từ đó kích hoạt hệ thống miễn dịch bẩm sinh để duy trì sự sống sót của có thể. Chúng còn được coi là cầu nối giữa miễn dịch không đặc hiệu và miễn dịch đặc hiệu. [19] , [20] TLR4 là protein liên quan đến thụ thể giống toll đầu tiên được xác định ở người và được biểu hiện trên bề mặt của các tế bào miễn dịch không đặc hiệu, chẳng hạn như đại thực bào và bạch cầu trung tính, cũng như trên tế bào lympho T và B, trung gian cho quá trình miễn dịch đặc hiệu. TLR4 có thể nhận biết cụ thể nội độc tố và lipopolysaccharide (LPS) do vi khuẩn tiết ra. [21] Sự kết hợp giữa LPS và TLR4 có thể gây ra một loạt các phản ứng, cuối cùng dẫn đến việc giải phóng một số lượng lớn các chất trung gian gây viêm (như TNF-α và IL-6). Trong những năm gần đây, người ta đã chứng minh rằng hệ vi sinh vật đường ruột có thể ảnh hưởng đến sự phát triển của cơn đau do hóa trị liệu thông qua con đường LPS-TLR4. [5]. Do đó, trong nghiên cứu hiện tại, người ta đưa ra giả thuyết rằng liệu pháp uống nước giàu hydro có thể ức chế con đường LPS-TLR4 và phản ứng của nó bằng cách điều chỉnh sự phong phú và tính biến đổi của hệ vi sinh vật đường ruột, từ đó phát huy tác dụng điều trị đối với CINP.

Nguyên liệu và phương pháp

Động vật
Quy trình thí nghiệm này được ủy quyền bởi Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật Thể chế của Đại học Y Thiên Tân (số phê duyệt IRB2019-DW-07) và được thực hiện theo hướng dẫn của Viện Y tế Quốc gia về việc chăm sóc và sử dụng động vật thí nghiệm. Chuột cái C57BL/6J được 8 tuần tuổi và nặng 20–25 g mỗi con được mua từ Trung tâm Động vật Phòng thí nghiệm của Học viện Khoa học Quân y (Bắc Kinh, Trung Quốc). Động vật được nhốt trong lồng ở nhiệt độ phòng (20-22°C) trong chu kỳ sáng/tối 12/12 giờ đều đặn, được cho ăn thức ăn và nước uống tùy thích.
Giao thức thử nghiệm
Hình 1 thể hiện kế hoạch thử nghiệm. Chuột được chia ngẫu nhiên thành 4 nhóm: Nhóm chuột được cho ăn nước uống bình thường và được tiêm nước muối sinh lý (nhóm H2O + Saline), nhóm chuột được cho ăn nước uống bình thường và được tiêm oxaliplatin (nhóm H2O + OXA), nhóm chuột được cho ăn bằng nước uống bình thường và được tiêm oxaliplatin. chuột được cho ăn bằng nước giàu hydro và được tiêm nước muối (nhóm HW + Saline) và những con chuột được cho ăn bằng nước giàu hydro và được tiêm oxaliplatin (nhóm HW + OXA). Oxaliplatin được tiêm ở nồng độ 0,2 mg/mL. Chuột ở nhóm H2O + OXA và HW + OXA được tiêm trong màng bụng dung dịch oxaliplatin với liều 3 mg/kg mỗi lần trong 5 ngày liên tục (từ ngày 1 đến ngày 5), chuột ở nhóm H2O + Nhóm nước muối và HW + nước muối được tiêm trong màng bụng với cùng liều lượng nước muối sinh lý thông thường trong 5 ngày; nước giàu hydro đã được xử lý trong toàn bộ thí nghiệm. Một ngày trước khi tiêm OXA hoặc nước muối (vào ngày 0), độ hòa tan của H2 trong nước bình thường hoặc nước giàu hydro được phát hiện ở các thời điểm 0, 5, 10 và 30 phút và 1, 12 và 24 giờ sau khi thổi khí hydro. vào nước uống. Chuột đã được kiểm tra ngưỡng cơ học rút chân cơ học (PWMT) vào lúc 1, 5, 10, 15 và 20 ngày sau khi xử lý bằng nước giàu hydro. Tiếp theo, phân của chuột từ tất cả các nhóm được thu thập để phân tích sự đa dạng của cộng đồng vi sinh vật vào ngày 20. Những con chuột được gây mê bằng cách tiêm pentobarbital natri 2% (pha loãng thành 50 mg/kg và hòa tan trong nước muối) vào khoang bụng và sau đó hy sinh do trật khớp cổ tử cung sau khi thu thập phân để thu được các đoạn DRG, L4-L6 của tủy sống và huyết thanh vào ngày 20. Mẫu vật thu được từ 5 con chuột trong mỗi nhóm được sử dụng cho cytokine gây viêm (TNF-α và IL-6), chất oxy hóa chỉ báo stress (OH − và ONOO − ), xác định LPS và TLR4 bằng xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết enzyme (ELISA). DRG và tủy sống của 5 con chuột trong mỗi nhóm được sử dụng để đo TLR4 bằng phân tích Western blot.
Hình 1 Thiết kế thí nghiệm. Chuột cái C57BL/6J WT cái 8 tuần tuổi và nặng 20–25 g được tiêm nước muối hoặc oxaliplatin. Nước uống giàu hydro hoặc bình thường được sử dụng cho toàn bộ thí nghiệm. Một ngày trước khi tiêm OXA hoặc nước muối (vào ngày 0), độ hòa tan của H2 trong nước bình thường hoặc nước giàu hydro được phát hiện ở các thời điểm 0, 5, 10 và 30 phút và 1, 12 và 24 giờ sau khi thổi khí hydro. vào nước uống. SWT được thực hiện 1, 5, 10, 15 và 20 ngày sau khi tiêm nước muối hoặc oxaliplatin. Phân của các nhóm khác nhau được lấy để kiểm tra sau khi kiểm tra PMT. DRG và tủy sống của các đoạn L4-6 và huyết thanh của các nhóm khác nhau đã được lấy để xét nghiệm sau khi lấy phân vào ngày 20. Các nhóm DRG, tủy sống và huyết thanh khác nhau đã được sử dụng cho ELISA, còn DRG và tủy sống được sử dụng cho Western blot phân tích, như đã đề cập trong phần Vật liệu và Phương pháp.
Chữ viết tắt: WT, kiểu hoang dã; PWMT, ngưỡng cơ học rút chân; DRG, hạch rễ lưng.
Chuẩn bị nước giàu hydro
Nước uống thông thường được cho vào chai uống có đầu vào và đầu ra, và khí hydro được tạo ra bởi máy tạo hydro có độ tinh khiết cao GCH-300 (Công ty TNHH Công nghệ Dụng cụ Phân tích Thiên Tân Tongpu), và khí hydro được tạo ra thổi vào nước uống với tốc độ dòng 400 mL/phút trong 10 phút để tạo ra nước giàu hydro [độ hòa tan H2 , >1.000 phần tỷ (PPb)]. Sau 10 phút, tốc độ dòng khí thay đổi thành 100 mL/phút; Tiếp tục thổi vào nước uống để duy trì độ hòa tan của các phân tử hydro trong nước giàu hydro (800–1.000 PPb) và xả khí thải qua đầu ra của chai nước uống vào thiết bị thu hồi khí thải. Chai nước uống được đặt trong lồng để chuột uống trong 24 giờ. Nước giàu hydro cần được thay thế hàng ngày để đảm bảo nồng độ hydro và độ sạch của nước uống.
Đo độ hòa tan H2
Độ hòa tan của H2 trong nước bình thường hoặc nước giàu hydro được phát hiện ở 0, 5, 10 và 30 phút và 1, 12 và 24 giờ sau khi thổi khí hydro vào nước uống bằng máy thử hydro hòa tan (ENH-1000). Máy đo Hydro H2 phân tử, Trustlex, Nhật Bản), theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Độ hòa tan H2 được đo ba lần tại mỗi thời điểm.
Chuẩn bị mô hình động vật CINP
Oxaliplatin được hòa tan trong nước muối sinh lý để tạo thành hỗn dịch 0,2 mg/mL. Chuột ở nhóm H2O + OXA và HW + OXA được tiêm trong màng bụng dung dịch oxaliplatin với liều 3 mg/kg mỗi lần; chúng được tiêm liên tục trong 5 ngày để chuẩn bị mô hình động vật CINP. Chuột trong nhóm H2O + Saline và HW + Saline được tiêm trong màng bụng với cùng một liều nước muối thông thường trong 5 ngày. Thí nghiệm đã được thực hiện như mô tả trước đây. [5]
Kiểm tra hành vi
Tất cả động vật thích nghi với môi trường thử nghiệm trong 3 ngày trước khi đo ngưỡng đau. Các sợi Von Frey điện tử (BSEVF3; Harward Apparatus Co., USA) đã được sử dụng để phát hiện sự kích thích cơ học và các số liệu được ghi lại dưới dạng SWT. PPPT được đo như mô tả trước đây. [22]
Thu thập và chuẩn bị mẫu phân
Chuột đi đại tiện bằng phương pháp cưỡng bức hoặc xoa bụng và lấy mẫu phân trực tiếp vào ống vô trùng. Các mẫu được thu thập từ cùng một con chuột được trộn đều, phân chia vào 2 mL ống lạnh vô trùng nhập khẩu, cân và ghi lại, thu một lượng đủ để dự phòng nhiều lần cho mỗi mẫu. Các mẫu được đông lạnh bằng nitơ lỏng trong 15 phút và sau đó được giữ ở −80 ° C trong ống lạnh vô trùng như mô tả trước đây. 23 Để phân tích tính đa dạng của quần thể vi sinh vật, tổng số DNA bộ gen trong các mẫu được rút ra bằng phương pháp CTAB/SDS. Gen rRNA 16S/18S được khuếch đại bằng cách sử dụng mồi cụ thể có mã vạch. Một thể tích tương đương của dung dịch đệm tải 1X (chứa màu xanh lá cây SYB) đã được trộn với sản phẩm PCR và điện di trên gel agarose 2% để phát hiện. Các mẫu có dải chỉnh sáng trong khoảng 400–450 bp đã được chọn để thử nghiệm thêm. Sản phẩm PCR được trộn theo tỷ lệ bằng nhau. Sản phẩm PCR sau đó được tinh chế bằng Bộ tách chiết gel GeneJET (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Theo hướng dẫn của nhà sản xuất, một thư viện giải trình tự đã được tạo ra bởi Bộ công cụ chuẩn bị thư viện Illumina NEB Next ® UltraTM DNA (NEB, Hoa Kỳ) có thêm mã chỉ mục. Chất lượng thư viện được đánh giá trên máy đo huỳnh quang Qubit@ 2.0 (Thermo Fisher Scientific, Inc.) và hệ thống Agilent Bioanalyzer2100. Cuối cùng, thư viện đã được giải trình tự trên nền tảng Illumina MiSeq và số lần đọc cuối được ghép nối là 250/300 bp đã được tạo ra.
Phân tích sự đa dạng của cộng đồng vi sinh vật
Đơn vị phân loại hoạt động (OTU) là cùng một điểm đánh dấu được đặt nhân tạo cho một đơn vị phân loại (chủng, chi, loài, quần thể, v.v.) để tạo điều kiện thuận lợi cho việc phân tích trong nghiên cứu phát sinh loài hoặc di truyền quần thể. Phân tích trình tự được thực hiện bởi gói phần mềm UPARSE bằng thuật toán UPARSE-OTUref và UPARSE-OTU. Các tập lệnh Perl nội bộ đã được áp dụng để phân tích tính đa dạng alpha (trong mẫu) và beta (trong mẫu). Các chuỗi có độ tương tự ≥97% được gán cho cùng một OTU. Một chuỗi đại diện đã được chọn cho mỗi OTU và bộ phân loại RDP được sử dụng để gắn nhãn thông tin phân loại cho từng chuỗi đại diện. Để tính toán độ đa dạng ɑ, bảng OTU đã được xác nhận và ba chỉ số đã được tính toán: Sự phong phú của các loài được đánh giá theo ước tính Chao1; số lượng OTU duy nhất được phát hiện trong mỗi mẫu vật và chỉ số Shannon và Simpson được ước tính bằng quan sát loài. Đường cong hiếm được tạo ra dựa trên ba chỉ số này. [23] – [25]
ELISA
DRG, tủy sống và huyết thanh thu được sau khi ly tâm ở tốc độ 3.000 xg trong 15 phút ở 4°C để ước tính biểu hiện của các cytokine gây viêm (TNF-α và IL-6), các chỉ số stress oxy hóa (OH − và ONOO − ), LPS và TLR4 bằng bộ dụng cụ ELISA có bán trên thị trường (bộ dụng cụ ELISA chuột TNF-α, IL-6, LPS và TLR4 của Công ty TNHH Công nghệ sinh học SenBeiJia; bộ dụng cụ OH − và ONOO − của Công ty TNHH Công nghệ sinh học Jianglai) sử dụng đĩa vi mô đọc, làm theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Tất cả các mẫu được chạy trùng lặp.
Phân tích Western Blot
Phân tích Western blot đã được thực hiện để xác nhận biểu hiện của TLR4 trong DRG và dây cột sống của chuột. Các mẫu được phân tách bằng SDS-PAGE bằng gel polyacrylamide TIS gấp đôi 8% (mèo số M00655; GenScript Biotech Corporation) và chuyển sang màng nitrocellulose (Bio-Rad Laboratories, Inc.). Màng này được ủ trong sữa bột gầy 5% và được phát hiện bằng cách sử dụng các kháng thể sau: β-Actin (mèo số 4970T; độ pha loãng, 1:1.000; Cell Signaling Technology, Inc.) và TLR4 (mèo số 14358S; độ pha loãng, 1 :1.000; Công nghệ tín hiệu tế bào, Inc.). Sau khi rửa ở nhiệt độ 4°C qua đêm, kháng thể kháng thỏ của dê (mèo số abs20002ss; độ pha loãng, 1:8.000; Absin Bioscience Inc.) được thêm vào, sau đó ủ ở 37°C trong 1 giờ. Màng nitrocellulose được rửa trong TBST và nhỏ giọt chất lỏng phát quang hóa ECL (mèo số 34577; Thermo Fisher Scientific, Inc.), sau đó được quét và chụp ảnh bằng hệ thống phân tích hình ảnh Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories, Inc.). Mức độ biểu hiện của protein mục tiêu được phản ánh bằng tỷ lệ giữa mật độ quang học tích hợp của dòng mục tiêu so với-actin.
Phân tích thống kê
Sự khác biệt của cộng đồng vi sinh vật được phân tích bằng cách sử dụng phân tích các điểm tương đồng, quy trình hoán vị đa phản ứng và ma trận khoảng cách vi sai Bray-Curtis. Phân tích phân biệt tuyến tính Kích thước hiệu ứng được sử dụng để phân tích định lượng các dấu ấn sinh học trong các nhóm khác nhau. Phân tích phương sai hai chiều được thực hiện để phân tích sự khác biệt giữa các nhóm trong tất cả các so sánh. Phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm GraphPad Prism (phiên bản 8.0) và phần mềm thống kê SPSS (phiên bản 21.0). P <0,05 được coi là biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa thống kê, được xác định bằng thử nghiệm hai đuôi. Tất cả dữ liệu được thể hiện dưới dạng trung bình ± SD.
Kết quả
Độ hòa tan của H2 trong nước thường và nước giàu hydro ở các thời điểm khác nhau
Độ hòa tan của H2 trong nước bình thường hoặc nước giàu hydro được phát hiện ở 0, 10 và 30 phút và 1, 12 và 24 giờ sau khi thổi khí hydro hoặc không có gì vào nước uống. Kết quả cho thấy không có H2 hòa tan trong nước uống thông thường, độ hòa tan H2 trong nước bình thường là 0 ppb tại mọi thời điểm. Trong 10 phút đầu tiên, tốc độ thổi của H2 là 400 mL/phút và độ hòa tan H2 tăng nhanh theo thời gian, đạt đỉnh 1.200 ppb. Tốc độ thổi của H2 sau đó được thay đổi thành 100 mL/phút và độ hòa tan của H2 giảm nhẹ và duy trì ở mức 900–1.000 ppb cho đến thời điểm 24 giờ ( Hình 2 ).
Hình 2 Độ hòa tan của H2 trong nước thường và nước giàu hydro ở các thời điểm khác nhau. Độ hòa tan của H2 trong nước bình thường hoặc nước giàu hydro được phát hiện ở 0, 10 và 30 phút và 1, 12 và 24 giờ sau khi thổi khí hydro vào nước uống. Tốc độ dòng H 2 là 400 mL/phút trong 10 phút đầu tiên và 100 mL/phút từ 10 phút đến 24 giờ. Độ hòa tan H 2 được đo ba lần tại mỗi thời điểm. H2 , hydro phân tử. *P<0,05 so với nhóm H 2 O.
Xử lý nước giàu hydro làm giảm đáng kể chứng tăng cảm giác đau cơ học ở chuột bị chứng tăng cảm giác đau do Oxaliplatin gây ra
Chuột được tiếp xúc với nước uống bình thường hoặc nước giàu hydro bằng cách tiêm nước muối hoặc oxaliplatin. Như được hiển thị trong Hình 3 , không có sự khác biệt đáng kể về ngưỡng cơ học cơ bản giữa nhóm HW + Nước muối và H2O + Nước muối (P>0,05, HW + Nước muối so với H2O + Nước muối). Ngoài ra, so với nhóm H 2 O + OXA, nước giàu hydro đã cải thiện đáng kể tình trạng tăng cảm giác đau cơ học của chuột CINP sau 10 ngày (P<0,05, HW + OXA so với H2O + OXA). Dựa trên những dữ liệu này, người ta thấy nước giàu hydro có tác dụng bảo vệ đáng kể đối với chuột mắc CINP do oxaliplatin gây ra.
Hình 3 Ảnh hưởng của nước giàu hydro đến ngưỡng cơ học rút chân ở chuột CINP. Chuột được xử lý bằng nước uống giàu hydro hoặc nước uống bình thường và tiêm nước muối hoặc oxaliplatin trong suốt thời gian thí nghiệm. Các giá trị được trình bày dưới dạng SWT giữa các nhóm ( A ) H2O + Saline và HW + Saline và ( B ) H2O + OXA và HW + OXA ( n = 10 con chuột mỗi nhóm). *P<0,05 so với nhóm H2O + OXA.
Chữ viết tắt: CINP, đau thần kinh do hóa trị liệu; -PWMT, ngưỡng cơ học rút chân.
Nước giàu hydro làm giảm sự đa dạng và làm thay đổi cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột ở chuột.
Sự đa dạng và cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột được phát hiện bằng cách khuếch đại và giải trình tự các gen 16S rDNA. Để chứng minh rằng kết quả thu được từ các mẫu thể hiện trạng thái thực sự của vi sinh vật, chỉ số độ bao phủ của Good được sử dụng để xác định độ bao phủ của từng thư viện mẫu ( Hình 4A ), và tất cả các bộ dữ liệu đều gần bằng 1; điều này có nghĩa là kết quả giải trình tự thể hiện trạng thái thực sự của vi sinh vật trong mẫu. Sự đa dạng của hệ vi sinh vật đường ruột ở bốn nhóm chuột được thể hiện dưới dạng đa dạng cộng đồng ( Hình 4B và C ). So với những con chuột uống nước thông thường, nước giàu hydro làm tăng đáng kể chỉ số Simpson và giảm chỉ số Shannon (P<0,05, HW + OXA so với H 2 O + OXA; P<0,05, HW + Saline so với H 2 O + nước muối); tuy nhiên, không có sự khác biệt thống kê về sự đa dạng trong cộng đồng của những con chuột uống cùng một loại nước (P>0,05, H 2 O + Saline so với H 2 O + OXA; P>0,05, HW + Saline so với HW + OXA).
Hình 4 Ảnh hưởng của nước giàu hydro đến độ phong phú và tính đa dạng của hệ vi sinh vật trong phân của chuột CINP. Các mẫu phân được lấy vào ngày thứ 20 từ những con chuột được cho ăn nước uống giàu hydro hoặc nước uống bình thường và được tiêm nước muối hoặc oxaliplatin. Dữ liệu được vẽ biểu đồ được trình bày dưới dạng trung bình ± SD của phạm vi bao phủ ( A ), ( B ) Shannon và ( C ) Simpson. *P<0,05 so với H 2 O + Nước muối; # P<0,05 so với H 2 O + OXA (n=6 con chuột mỗi nhóm).
Chữ viết tắt: CINP, đau thần kinh do hóa trị liệu.
Cụ thể theo kết quả phân loại loài, cấu trúc hệ vi sinh vật đường ruột ở bốn nhóm chuột được trình bày dưới dạng mức độ phong phú tương đối của hệ vi sinh vật đường ruột ở cấp độ ngành, họ và chi. Ở cấp độ ngành, việc xử lý nước giàu hydro đã làm tăng sự phong phú tương đối của Firmicutes và Tenericutes, đồng thời làm giảm sự phong phú tương đối của Bacteroidetes (P<0,05, HW + Saline so với H2O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với H2O + OXA) ( Hình 5A và Bảng S1 ). Ở cấp độ họ, hàm lượng Lachnospiraceae, Lactobacillaceae và Ruminococcaceae cao hơn trong phân của chuột được xử lý bằng nước giàu hydro (P<0,05, HW + Saline so với H2O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với H2O + OXA), trong khi Bifidobacteriaceae và Erysipelotrichaceae chỉ giảm ở nhóm HW + OXA, so với nhóm H2O + OXA (P<0,05, HW + OXA so với H2O + OXA) ( Hình 5B và Bảng S2 ). Ở cấp độ chi, nước giàu hydro làm tăng hàm lượng Faecalibacteria, Lactobacillus và Roseburia trong phân chuột (P<0,05, HW + Saline so với H 2 O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với H2O + OXA). So với nhóm H2O + OXA, mức độ Bifidobacteria đã giảm đáng kể ở nhóm HW + OXA (P<0,05, HW + OXA so với H2O + OXA) ( Hình 5C và Bảng S3 ). Những dữ liệu này chỉ ra rằng nước giàu hydro có thể làm giảm sự đa dạng của cộng đồng và thay đổi cấu trúc cộng đồng để làm giảm chứng tăng cảm giác đau.
Hình 5 Ảnh hưởng của nước giàu hydro đến thành phần loài và sự thay đổi của quần thể vi sinh vật trong phân của chuột CINP. Các mẫu phân được lấy vào ngày thứ 20 từ những con chuột được cho ăn nước uống giàu hydro hoặc nước uống bình thường và được tiêm nước muối hoặc oxaliplatin. ( A – C ) Sự phong phú tương đối của hệ vi sinh vật đường ruột ở cấp độ ( A ) phylum, ( B ) và chi ( C ) ở các nhóm khác nhau ( n = 6 con chuột mỗi nhóm).
Nước giàu hydro đảo ngược sự mất cân bằng của tình trạng viêm và stress oxy hóa do Oxaliplatin gây ra
Sau khi điều trị bằng oxaliplatin, sự biểu hiện của các cytokine gây viêm TNF-α và IL-6 đã tăng lên đáng kể (P<0,05, H 2 O + OXA so với H 2 O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với HW + Saline). Tuy nhiên, nước giàu hydro có thể làm giảm sự biểu hiện của TNF-α và IL-6 ở chuột CINP (P<0,05, HW + OXA so với H 2 O + OXA). Trong số ba loại mẫu này, DRG, tủy sống và huyết thanh, sự khác biệt về nồng độ TNF-α và IL-6 chỉ được quan sát thấy ở DRG ( Hình 6A và B ).
Hình 6 Ảnh hưởng của nước giàu hydro đến sự biểu hiện của các cytokine gây viêm và các chỉ số căng thẳng oxy hóa trong DRG, tủy sống và huyết thanh của chuột CINP. Các cytokine gây viêm ( A ) TNF-α và ( B ) IL-6, và các chỉ số stress oxy hóa ( C ) OH − và ( D ) ONOO − được đo bằng DRG, tủy sống và huyết thanh của chuột bằng ELISA trong mỗi nhóm (n=5 con chuột mỗi nhóm). *P<0,05 so với nhóm H 2 O + Nước muối; & P<0,05 so với nhóm CTNH + Nước muối; # P<0,05 so với nhóm H 2 O + OXA.
Chữ viết tắt: CINP, đau thần kinh do hóa trị liệu; DRG, hạch rễ lưng.
Những phát hiện này cũng tương tự đối với các chỉ số căng thẳng oxy hóa. So với việc tiêm nước muối, nồng độ OH − và ONOO − tăng đáng kể ở chuột được tiêm oxaliplatin (P<0,05, H 2 O + OXA so với H 2 O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với HW + nước muối). So với nhóm H 2 O + OXA, mức độ OH − và ONOO − ở chuột thuộc nhóm HW + OXA đã giảm đáng kể (P<0,05, HW + OXA so với H 2 O + OXA). Tương tự, sự khác biệt trong biểu hiện của OH − và ONOO − chỉ được quan sát thấy ở DRG và không có sự khác biệt đáng kể nào về tủy sống và huyết thanh ( Hình 6C và D ). Những dữ liệu này chỉ ra rằng DRG có thể đóng một vai trò quan trọng trong sinh bệnh học của CINP, chứng tăng cảm giác đau do oxaliplatin gây ra có liên quan đến stress oxy hóa và viêm, và nước giàu hydro có thể đảo ngược sự mất cân bằng này.
Nước giàu hydro làm giảm chứng tăng cảm giác đau do Oxaliplatin gây ra bởi hệ vi sinh vật đường ruột thông qua con đường LPS-TLR4
Chứng tăng cảm giác đau do oxaliplatin gây ra được phát hiện có liên quan đến phản ứng viêm và hệ vi sinh vật đường ruột; do đó chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng nó có thể được trung gian bởi LPS trong hệ vi sinh vật đường ruột. Những con chuột bình thường và chuột uống nước giàu hydro được tiêm oxaliplatin hoặc nước muối. Như được hiển thị trong Hình 6A , điều trị bằng oxaliplatin có thể làm tăng nồng độ LPS trong huyết thanh và DRG của chuột (P<0,05, H 2 O + OXA so với H 2 O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với HW + Saline), cũng như so với điều trị bằng nước muối, nhưng không thấy sự khác biệt đáng kể ở tủy sống (P> 0,05). Đồng thời, nồng độ LPS trong huyết thanh và DRG của chuột CINP uống nước bình thường cao hơn đáng kể so với chuột CINP uống nước giàu hydro (P<0,05, HW + OXA so với H 2 O + OXA). Vì LPS có thể được TLR4 nhận dạng cụ thể nên biểu thức của TLR4 đã được phát hiện thêm. Kết quả phân tích Western blot và ELISA đều nhất quán. Giống như LPS, nồng độ TLR4 trong huyết thanh và DRG của chuột được điều trị bằng oxaliplatin tăng rõ rệt (P<0,05, H 2 O + OXA so với H 2 O + Saline; P<0,05, HW + OXA so với HW + Saline), nhưng điều tương tự không được quan sát thấy ở tủy sống (P > 0,05); nước giàu hydro có thể làm giảm sự gia tăng này (P<0,05, HW + OXA so với H 2 O + OXA; Hình 7B – D ). Những kết quả này chỉ ra rằng nước giàu hydro có thể ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật đường ruột và làm giảm hơn nữa sự xuất hiện của chứng tăng cảm giác đau cơ học do oxaliplatin gây ra thông qua con đường LPS-TLR4.
Hình 7 Ảnh hưởng của nước giàu hydro đến sự biểu hiện LPS và TLR4 ở chuột CINP. ( A ) Sự biểu hiện của LPS được phát hiện trong DRG, tủy sống và huyết thanh của chuột bằng ELISA ở mỗi nhóm. ( B ) Sự biểu hiện của TLR4 được phát hiện trong DRG, tủy sống và huyết thanh của chuột bằng ELISA ở mỗi nhóm. ( C ) Biểu hiện của TLR4 được phát hiện bằng phân tích Western blot. ( D ) Phân tích định lượng TLR4 được trình bày dưới dạng tỷ lệ giữa mật độ dải so với β-actin. n=5 con chuột mỗi nhóm. *P<0,05 so với nhóm H 2 O + Nước muối; & P<0,05 so với nhóm CTNH + Nước muối; # P<0,05 so với nhóm H 2 O + OXA.
Chữ viết tắt: LPS, lipopolysacarit; TLR4, thụ thể giống Toll 4; CINP, đau thần kinh do hóa trị liệu; DRG, hạch rễ lưng.

Cuộc thảo luận

H2 hiện được coi là một loại khí y tế đầy hứa hẹn có khả năng ngăn ngừa hoặc chữa trị nhiều loại bệnh lý, chẳng hạn như tổn thương do thiếu máu cục bộ-tái tưới máu, thoái hóa thần kinh, hội chứng chuyển hóa, viêm nhiễm, bệnh ty thể và thậm chí cả ung thư. [10] Các nghiên cứu trước đây do nhóm của chúng tôi công bố đã chỉ ra rằng nước giàu hydro có khả năng chống lại một số bệnh và các phương pháp cung cấp H2 khác nhau sẽ có hiệu quả để điều trị một số bệnh đường ruột. [12] , [26] Nghiên cứu hiện tại đã chứng minh rằng nước giàu hydro có ảnh hưởng đến sự đa dạng và cấu trúc của vi khuẩn đường ruột, điều này có thể giải thích tại sao nước giàu hydro có thể làm giảm chứng tăng cảm giác đau do oxaliplatin gây ra.
Trong một nghiên cứu trước đây, mô hình CINP trên chuột đã được thiết lập bằng cách tiêm oxaliplatin trong màng bụng, như đã mô tả trước đây.[5] Nghiên cứu hiện tại cho thấy rằng không có sự khác biệt đáng kể về ngưỡng cơ học cơ bản giữa các nhóm chuột khác nhau. So với nhóm chuột ban đầu và chuột trong H2O + Saline, thì có sự khác biệt đáng kể được quan sát thấy trong ngưỡng cơ học ở nhóm chuột H2O + OXA sau 5 ngày tiêm oxaliplatin, tăng cảm giác đau xảy ra sau 10 ngày trong nhóm chuột HW + OXA. Kết quả về hành vi chỉ ra rằng chuột CINP có biểu hiện tăng cảm giác đau rõ rệt, trong khi chứng tăng cảm giác đau cơ học ở chuột uống nước giàu hydro được cải thiện đáng kể ( Hình 3 ). Trong nghiên cứu hiện tại, một mô hình chuột mắc CINP do oxaliplatin gây ra đã được thiết lập thành công và người ta đã chứng minh rằng nước giàu hydro có thể cải thiện đáng kể tình trạng tăng cảm giác đau cơ học ở chuột mắc CINP do oxaliplatin gây ra.
Hệ vi sinh vật đóng vai trò then chốt trong quá trình trao đổi chất của cơ thể. [6] Trong điều kiện bình thường, vi khuẩn cư trú trong đường ruột và cấu trúc không gian vi mô của cơ thể tạo thành một hệ thống sinh thái vi mô tương tác và phụ thuộc lẫn nhau, và vi sinh vật đường ruột tạo thành một hàng rào bảo vệ quan trọng chống lại mầm bệnh. [5] , [27] Khi sự ổn định của hệ vi sinh vật bị phá hủy, sức đề kháng của đường ruột giảm đi rất nhiều, điều này có thể dẫn đến sự xâm nhập của các mầm bệnh tiềm ẩn trong ruột. [23] , [24] Trong nghiên cứu hiện tại, khi tiêm oxaliplatin, chuột được tiếp xúc với nước uống bình thường hoặc nước giàu hydro, điều này được tiếp tục trong suốt thí nghiệm. Tin tức của Good cho thấy mẫu kết quả có thể phản ánh tình trạng thực sự của vi sinh vật trong phân chuột. Người ta đã chứng minh rằng những thay đổi trong hệ vi sinh vật đường ruột không làm thay đổi sự phân bố mô của oxaliplatin và các nghiên cứu đã chỉ ra rằng hệ vi sinh vật đường ruột có thể làm giảm cơn đau do oxaliplatin gây ra. [1] ,[5] , [28] Phù hợp với các nghiên cứu trước đây, người ta thấy rằng thành phần và cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột của chuột uống cùng loại nước đã thay đổi sau khi điều trị bằng oxaliplatin, điều này cho thấy mối liên quan giữa hệ vi sinh vật đường ruột và oxaliplatin. Người ta cũng chứng minh rằng nước giàu hydro làm giảm độ đa dạng ɑ được đo bằng chỉ số Shannon và Simpson, đồng thời làm thay đổi thành phần và cấu trúc nhóm của hệ vi sinh vật đường ruột (Hình 4). Các chỉ số Shannon và Simpson thường được sử dụng để ước tính về tính đa dạng của hệ vi sinh vật trong các mẫu và phản ánh chỉ số ɑ-đa dạng. Hai chỉ số này có xu hướng trái ngược nhau về mối liên hệ với sự đa dạng; Giá trị Shannon càng cao thì tính đa dạng của cộng đồng càng cao và chỉ số Simpson càng cao thì tính đa dạng của cộng đồng càng thấp. Người ta đã báo cáo rằng nước giàu hydro có thể cải thiện đáng kể chức năng đường tiêu hóa và tính toàn vẹn biểu mô của chuột sau khi chiếu xạ toàn bộ vùng bụng. [29] Do đó, nước giàu hydro có thể bảo vệ chức năng đường tiêu hóa và tính toàn vẹn biểu mô bằng cách thay đổi tính đa dạng và cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột chuột, từ đó cải thiện CINP.
Căng thẳng oxy hóa và giải phóng quá mức các cytokine gây viêm được coi là yếu tố quan trọng của CINP do oxaliplatin gây ra. [30] Để đánh giá tác dụng của nước giàu hydro đối với CINP do oxaliplatin gây ra, người ta đã kiểm tra biểu hiện của các cytokine gây viêm, bao gồm cả biểu hiện của các yếu tố gây viêm TNF-α và IL-6. Mức độ của các chỉ số căng thẳng oxy hóa OH − và ONOO − cũng đã được kiểm tra. Căng thẳng oxy hóa là do hoạt động không hiệu quả của hệ thống phòng thủ chống oxy hóa nội sinh chống lại các loại oxy phản ứng, [31] cụ thể là phản ứng viêm và mất cân bằng stress oxy hóa. Kết quả của nghiên cứu này cho thấy oxaliplatin có thể làm tăng đáng kể nồng độ các cytokine gây viêm TNF-α và IL-6 ở chuột CINP, cũng như biểu hiện các chỉ số stress oxy hóa OH − và ONOO − , trong khi nước giàu hydro ức chế các chỉ số này. Trong số DRG, tủy sống và huyết thanh, những khác biệt này chỉ được quan sát thấy ở DRG (Hình 6). Những phát hiện trên ủng hộ quan điểm rằng DRG có thể đóng một vai trò quan trọng trong sinh bệnh học của CINP, chứng tăng cảm giác đau do oxaliplatin gây ra có liên quan đến việc giải phóng quá mức các cytokine gây viêm và stress oxy hóa, và nước giàu hydro có thể đảo ngược sự mất cân bằng này.
Người ta đã báo cáo rằng hệ vi sinh vật đường ruột đóng vai trò quan trọng trong việc làm giảm cơn đau do viêm. [5] Những phát hiện ở hiện tại cho thấy hệ vi sinh vật đường ruột, phản ứng viêm và stress oxy hóa đều làm tăng cảm giác đau cơ học do oxaliplatin gây ra, và trước đây người ta đã chứng minh rằng LPS là một trong những yếu tố chính quyết định khả năng tự miễn dịch và tình trạng viêm bắt nguồn từ hệ vi sinh vật đường ruột. [32] Do đó, người ta đưa ra giả thuyết rằng chứng tăng cảm giác đau do oxaliplatin gây ra được điều hòa bởi LPS có nguồn gốc từ hệ vi sinh vật đường ruột. Dữ liệu hiện tại chỉ ra rằng tiêm oxaliplatin có thể làm tăng nồng độ LPS trong huyết thanh và DRG của chuột, nồng độ này đã giảm sau khi điều trị bằng nước giàu hydro; tuy nhiên, những khác biệt này không được phản ánh ở tủy sống. Vì TLR4 là phối tử của LPS, nên [33] TLR4 đã được kiểm tra thêm và kết quả cũng giống như kết quả đối với LPS ( Hình 7 ). Do đó, có thể suy ra rằng nước giàu hydro ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật đường ruột và làm giảm sự xuất hiện của CINP do oxaliplatin gây ra thông qua con đường LPS-TLR4.
Tuy nhiên, nghiên cứu này không phải là không có những hạn chế. Đầu tiên, người ta đã chứng minh rằng việc thay đổi hệ vi sinh vật đường ruột có thể làm giảm cơn đau do oxaliplatin gây ra trong một số nghiên cứu. Tuy nhiên, chúng tôi chỉ sử dụng nước giàu hydro để điều trị cho chuột CINP và nhận thấy nó có thể đảo ngược phản ứng đau và thay đổi hệ vi sinh vật ở chuột CINP. Nhưng chúng tôi đã không áp dụng phương pháp cấy ghép phân cho chuột CINP để xem liệu nó có thể làm giảm hoặc đảo ngược phản ứng đau trong điều kiện uống nước giàu hydro hay không. Chúng tôi sẽ xác nhận những điều này trong nghiên cứu trong tương lai. Thứ hai, chúng tôi chỉ sử dụng chuột cái trong nghiên cứu vì con cái không hung dữ như con đực, điều này dễ thực hiện bài kiểm tra hành vi hơn. Và các nghiên cứu đã chứng minh rằng không có sự khác biệt đáng kể về CINP do oxaliplatin gây ra giữa loài gặm nhấm đực và cái. [34] , [35]

Kết luận

Tóm lại, người ta đã chứng minh rằng nước giàu hydro ảnh hưởng đến con đường LPS-TLR4 bằng cách thay đổi tính đa dạng và cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột, từ đó cải thiện tình trạng tăng cảm giác đau cơ học do oxaliplatin gây ra và đảo ngược sự mất cân bằng của các cytokine gây viêm và stress oxy hóa, do đó làm giảm CINP. Vì vậy, H2 có thể là một phương pháp đầy hứa hẹn để giảm bớt CINP.
Sự nhìn nhận
Nghiên cứu hiện tại được hỗ trợ bởi Quỹ khoa học tự nhiên quốc gia Trung Quốc (cấp số 82072150 và 82001149).
Tiết lộ
Các tác giả báo cáo không có xung đột lợi ích trong công việc này.
Người giới thiệu
1. Rossignol J, Cozzi B, Liebaert F, và cộng sự. Nồng độ amitriptyline tại chỗ cao để điều trị các bệnh lý thần kinh do hóa trị liệu. Hỗ trợ Chăm sóc Ung thư . 2019;27(8):3053–3059. doi:10.1007/s00520-018-4618-y
2. Nakagawa T, Kaneko S. Vai trò của ankyrin 1 tiềm năng thụ thể tạm thời trong bệnh lý thần kinh ngoại biên do oxaliplatin gây ra. Biol Pharm Bull . 2017;40(7):947–953. doi:10.1248/bpb.b17-00243
3. Marmiroli P, Scuteri A, Cornblath DR, Cavaletti G. Đau do nhiễm độc thần kinh ngoại biên do hóa trị. Hệ thống thần kinh ngoại vi J. 2017;22(3):156–161. doi:10.1111/jns.12226
4. Boyette-Davis JA, Hou S, Abdi S, Dougherty PM. Một sự hiểu biết cập nhật về các cơ chế liên quan đến bệnh lý thần kinh do hóa trị liệu. Quản lý nỗi đau . 2018;8(5):363–375. doi:10.2217/pmt-2018-0020
5. Shen S, Lim G, You Z và cộng sự. Hệ vi sinh vật đường ruột rất quan trọng trong việc gây ra cơn đau do hóa trị. Nat Neurosci . 2017;20(9):1213–1216. doi:10.1038/nn.4606
6. Zhang H, Sparks JB, Karyala SV, Settlage R, Luo XM. Miễn dịch thích ứng của vật chủ làm thay đổi hệ vi sinh vật đường ruột ISME J. 2015;9(3):770–781. doi:10.1038/ismej.2014.165
7. Marchesi JR, Adams DH, Fava F, và cộng sự. Hệ vi sinh vật đường ruột và sức khỏe của vật chủ: một biên giới lâm sàng mới. Ruột . 2016;65(2):330–339. doi:10.1136/gutjnl-2015-309990
8. Cheng S, Ma X, Geng S, và cộng sự. Cấy ghép microbiota trong phân điều chỉnh có lợi cho quá trình tự thực bào của niêm mạc ruột và làm giảm tổn thương hàng rào ruột. mSystems . 2018;3(5):5. doi:10.1128/mSystems.00137-18
9. Zhang C, Li S, Yang L, và cộng sự. Điều chế cấu trúc của hệ vi sinh vật đường ruột ở chuột bị hạn chế calo suốt đời. Xã Nat . 2013;4(1):2163. doi:10.1038/ncomms3163
10. Xie K, Liu L, Yu Y, Wang G. Khí hydro đưa ra một chiến lược điều trị đầy hứa hẹn cho bệnh nhiễm trùng huyết. Biomed Res Int . 2014;2014:807635. doi:10.1155/2014/807635
11. Zhuang X, Yu Y, Jiang Y và cộng sự. Hydro phân tử làm giảm tình trạng viêm thần kinh do nhiễm trùng huyết thông qua việc điều hòa phân cực microglia thông qua con đường phụ thuộc vào mTOR-autophagy. Thuốc miễn dịch Int . 2020;81:106287. doi:10.1016/j.intimp.2020.106287
12. Yoneda T, Tomofuji T, Kunitomo M, và cộng sự. Tác dụng phòng ngừa của việc uống nước giàu hydro đối với tình trạng căng thẳng oxy hóa ở nướu và sự tái hấp thu xương ổ răng ở chuột được cho ăn chế độ ăn nhiều chất béo. Chất dinh dưỡng . 2017;9(1):1. doi:10.3390/nu9010064
13. Kasuyama K, Tomofuji T, Ekuni D, và cộng sự. Nước giàu hydro làm giảm tình trạng viêm nha chu thực nghiệm trên mô hình chuột. J Clin Nha chu . 2011;38(12):1085–1090. doi:10.1111/j.1600-051X.2011.01801.x
14. Yu Y, Yang Y, Yang M, Wang C, Xie K, Yu Y. Khí hydro làm giảm sự giải phóng HMGB1 trong mô phổi của chuột nhiễm trùng theo con đường phụ thuộc Nrf2/HO-1. Thuốc miễn dịch Int . 2019;69:11–18. doi:10.1016/j.intimp.2019.01.022
15. Yu Y, Feng J, Lian N, và cộng sự. Khí hydro làm giảm sự suy giảm hàng rào máu não và rối loạn chức năng nhận thức của chuột nhiễm trùng theo con đường phụ thuộc vào Nrf2. Thuốc miễn dịch Int . 2020;85:106585. doi:10.1016/j.intimp.2020.106585
16. Yan M, Yu Y, Mao X, và cộng sự. Hít phải khí hydro làm giảm tổn thương gan do nhiễm trùng huyết theo cách phụ thuộc vào FUNDC1. Thuốc miễn dịch Int . 2019;71:61–67. doi:10.1016/j.intimp.2019.03.021
17. Jiao Y, Yu Y, Li B, và cộng sự. Tác dụng bảo vệ của nước muối giàu hydro chống lại bệnh lý thần kinh ngoại biên do tiểu đường thực nghiệm thông qua việc kích hoạt các kênh kênh kali nhạy cảm ATP của ty thể ở chuột. Đại diện Mol Med . 2020;21(1):282–290. doi:10.3892/mmr.2019.10795
18. Carchman EH, Whelan S, Loughran P, và cộng sự. Sinh học ty thể do nhiễm trùng huyết gây ra thực nghiệm phụ thuộc vào quá trình tự thực bào, tín hiệu TLR4 và TLR9 ở gan. FASEB J. 2013;27(12):4703–4711. doi:10.1096/fj.13-229476
19. Li D, Gu R, Yang X, và cộng sự. TLR3 tương quan với di căn hạch cổ ở bệnh nhân ung thư tuyến giáp thể nhú. Int J Clinic Exp Med . 2014;7(12):5111–5117.
20. McCarron EP, Williams DP, Antoine DJ, và những người khác. Khám phá sự mất kết nối tịnh tiến giữa phản ứng viêm ở chuột và ở người: phân tích mối quan hệ giữa liều lượng LPS trong các dòng tế bào của chuột và người và ý nghĩa của việc chuyển sang mô hình nhiễm trùng huyết ở chuột. J Inflamm Res . 2015;8:201–209. doi:10.2147/JIR.S89097
21. Wang X, Li X, Zhang X, và cộng sự. Phản ứng viêm do thụ thể giống Toll 4 gây ra góp phần hình thành và xâm nhập các đại thực bào liên quan đến khối u ở những bệnh nhân mắc u lympho tế bào B lớn lan tỏa. Ann Chẩn đoán Pathol . 2015;19(4):232–238. doi:10.1016/j.andiagpath.2015.04.008
22. Yang J, Yuan F, Ye G, và cộng sự. Vết rạch và rút lại da/cơ gây ra cơn đau tự phát và gợi lên ở chuột. Quản lý đau Res . 2019;2019:6528528. doi:10.1155/2019/6528528
23. Flores R, Shi J, Yu G, và cộng sự. Phương tiện thu thập và tác dụng đông lạnh chậm đối với thành phần vi sinh vật trong phân người. Hệ vi sinh vật . 2015;3(1):33. doi:10.1186/s40168-015-0092-7
24. Plumb RS, Granger JH, Stumpf CL, và cộng sự. Một phương pháp sàng lọc nhanh chóng đối với siêu kinh tế học bằng phương pháp quang phổ khối UPLC và oa-TOF: áp dụng cho sự thay đổi về tuổi, giới tính và ngày đêm ở chuột béo phì bình thường/Zucker và chuột đen, trắng và khỏa thân. Nhà phân tích . 2005;130(6):844–849. doi:10.1039/b501767j
25. Benton HP, Ivanisevic J, Mahieu NG, và cộng sự. Chất chuyển hóa tự động để xác định chất chuyển hóa nhanh chóng trong hồ sơ toàn cầu. Chem Hậu Môn . 2015;87(2):884–891. doi:10.1021/ac5025649
26. Yamasaki M, Miyazono M, Yoshihara M, và cộng sự. Tác dụng của nước giàu hydro trong mô hình chuột mắc bệnh thận đa nang. XIN VUI LÒNG MỘT . 2019;14(4):e0215766. doi:10.1371/journal.pone.0215766
27. Finnicum CT, Beck JJ, Dolan CV, và cộng sự. Việc sống chung có liên quan đến sự tương đồng lớn hơn về hệ vi sinh vật đường ruột, điều này có thể ảnh hưởng đến nguy cơ viêm và chuyển hóa tim. Vi sinh vật BMC . 2019;19(1):230. doi:10.1186/s12866-019-1602-8
28. Pulvers JN, Marx G. Các yếu tố liên quan đến sự phát triển và mức độ nghiêm trọng của bệnh lý thần kinh ngoại biên do oxaliplatin gây ra: tổng quan hệ thống. Phòng khám Châu Á Pac J Oncol . 2017;13(6):345–355. doi:10.1111/ajco.12694
29. Xiao HW, Li Y, Luo D, et al. Nước hydro cải thiện độc tính đường tiêu hóa do bức xạ gây ra thông qua tác dụng của MyD88 đối với hệ vi sinh vật đường ruột. Exp Mol Med . 2018;50(1):e433. doi:10.1038/emm.2017.246
30. Duan Z, Su Z, Wang H, Pang X. Sự tham gia của đường dẫn tín hiệu tiền viêm trong tác dụng ức chế của rapamycin đối với chứng đau thần kinh do oxaliplatin gây ra. Mol Đau . 2018;14:1744806918769426. doi:10.1177/1744806918769426
31. Miletic J, Drakulic D, Pejic S, và cộng sự. Cân bằng chất chống oxy hóa-chất chống oxy hóa, các sản phẩm protein oxy hóa tiên tiến và quá trình peroxid hóa lipid ở bệnh nhân Serbia mắc bệnh Parkinson. Int J Thần kinh học . 2018;128(7):600–607. doi:10.1080/00207454.2017.1403916
32. Vatanen T, Kostic AD, d’Hennezel E, et al. Sự biến đổi trong khả năng miễn dịch của Microbiome LPS góp phần tạo ra khả năng tự miễn dịch ở người. Tế bào . 2016;165(6):1551. doi:10.1016/j.cell.2016.05.056
33. Ding D, Xu S, Zhang H, et al. 3-Methyladenine và dexmedetomidine đảo ngược tổn thương phổi cấp tính do lipopolysacarit gây ra thông qua việc ức chế viêm và tự thực. Exp Ther Med . 2018;15(4):3516–3522. doi:10.3892/etm.2018.5832
34. Nhà sản xuất bia A, Shirachi D, Quốck R, et al. Tác dụng của oxy cao áp đối với bệnh lý thần kinh do hóa trị liệu ở chuột đực và chuột cái. Behav Pharmacol . 2020;31(1):61–72. doi:10.1097/FBP.0000000000000497
35. Legakis L, Diester C, Townsend E, và cộng sự. So sánh tác dụng của hóa trị liệu đối với độ nhạy cơ học và phản ứng của người vận hành được duy trì bằng thực phẩm ở chuột đực và chuột cái. Behav Pharmacol . 2020;31(5):477–490. doi:10.1097/FBP.000000000000052
Lưu ý: Letus SuperWater là sản phẩm nước uống, không phải là thuốc và không có tác dụng thay thế thuốc chữa bệnh. Các thông tin trên trang chỉ mang tính tham khảo, không thay thế tư vấn, chẩn đoán hoặc điều trị của bác sĩ. Người đang điều trị bệnh cần hỏi ý kiến bác sĩ trước khi thay đổi chế độ uống nước.
Chia sẻ:

BÀI VIẾT LIÊN QUAN